核酸分子杂交是一项怎样的技术,有什么特点?
生活随笔
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核酸分子杂交是一项怎样的技术,有什么特点?
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核酸分子雜交是指不同來源的核酸單鏈以堿基配對的方式重新形成雙鏈。雜交可以在兩股DNA單鏈間形成,也可以在RNA與DNA單鏈之間形成。其實(shí)質(zhì)是核酸的變性與復(fù)性。不完全互補(bǔ)的兩條核酸單鏈也能雜交結(jié)合,但核酸單鏈之間堿基互補(bǔ)程度越高或互補(bǔ)區(qū)段越長,它們之間形成的氫鍵就越多,結(jié)合也就越牢固。通過改變反應(yīng)條件,可以控制雜交的嚴(yán)謹(jǐn)度。
核酸分子雜交的定義如樓上,特點(diǎn)是:雜交的雙方是待測核酸和已知核酸序列,已知 核酸序列稱探針。DNA變性與復(fù)性:DNA變性:導(dǎo)致兩條DNA鏈間的氫鏈斷裂變?yōu)閱捂湹倪^程。GC含量與Tm值之間的關(guān)系 (G+C)%=(Tm-69.3) ×2.44 Tm =(G+C)%×0.41+69.3復(fù)性過程:(1)單鏈分子間碰撞形成局部雙鏈(2)局部雙鏈周圍的堿基如不配對時(shí),雙鏈重新解離(3)局部雙鏈周圍的堿基如配對,則形成中心序列(4)形成完整的雙鏈分子復(fù)性的速率服從二級(jí)反應(yīng)動(dòng)力學(xué)現(xiàn)在使用最多的是Southern雜交和Northern印跡雜交
核酸分子雜交的定義如樓上,特點(diǎn)是:雜交的雙方是待測核酸和已知核酸序列,已知 核酸序列稱探針。DNA變性與復(fù)性:DNA變性:導(dǎo)致兩條DNA鏈間的氫鏈斷裂變?yōu)閱捂湹倪^程。GC含量與Tm值之間的關(guān)系 (G+C)%=(Tm-69.3) ×2.44 Tm =(G+C)%×0.41+69.3復(fù)性過程:(1)單鏈分子間碰撞形成局部雙鏈(2)局部雙鏈周圍的堿基如不配對時(shí),雙鏈重新解離(3)局部雙鏈周圍的堿基如配對,則形成中心序列(4)形成完整的雙鏈分子復(fù)性的速率服從二級(jí)反應(yīng)動(dòng)力學(xué)現(xiàn)在使用最多的是Southern雜交和Northern印跡雜交
總結(jié)
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