DNA測序已經(jīng)發(fā)展到第四代了，相對以前的測序技術(shù)來說更精確更快速了。過去三年，大規(guī)模平行 測序平臺已經(jīng)發(fā)展為主流的測序技術(shù)，DNA測序費用降到了以前的百分之一。目前，新的測序技術(shù)及手段還在不斷涌現(xiàn)，比如最新的進(jìn)展就包括建立序列數(shù)據(jù)庫、建立序列數(shù)據(jù)分析新方法以及設(shè)計測序試 驗等等。新一代DNA測序技術(shù)有助于人們以更低廉的價格，更全面、更深入地分析基因組、轉(zhuǎn)錄組及蛋白質(zhì)之間交互作用組的各項數(shù)據(jù)。

第一代測序技術(shù)：1977年Sanger等發(fā)明的雙脫氧核苷酸末端終止法和Gilbert等發(fā)明的化學(xué)降解法，標(biāo)志著第一代測序技術(shù)的誕生。除此之外，這一時期還出現(xiàn)了一些其他的測序方法，如焦磷酸測序法、連接酶測序法、雜交測序法等。第二代測序技術(shù)：以Roche公司的454技術(shù)、Illumina公司的Solexa技術(shù)、ABI公司的SOLiD技術(shù)為標(biāo)志的第二代測序技術(shù)。與第一代技術(shù)相比，第二代測序技術(shù)不僅保持了高準(zhǔn)確度，而且大大降低了測序成本并極大地提高了測序速度。第三代測序技術(shù)：近期出現(xiàn)的Helicos公司的Heliscope單分子測序儀、Pacific Biosciences公司的SMRT技術(shù)和Oxford Nanopore Technologies公司正在研究的納米孔單分子技術(shù)，被認(rèn)為是第三代測序技術(shù)。與前兩代技術(shù)相比，他們最大的特點是單分子測序。

現(xiàn)在的DNA測序技術(shù)已經(jīng)發(fā)展到了第三代。第一代測序技術(shù)是Sanger在1977年發(fā)明的末端終止測序法，基本過程是先合成（聚合酶合成反應(yīng)），后測序（進(jìn)行凝膠電泳），因為這個方法方便快捷，在長期的研究中不斷被完善，成為了DNA測序技術(shù)的主流。但是隨著科學(xué)研究的深入，Sanger法測序已經(jīng)不能完全滿足科學(xué)研究的需要，并且Sanger法的價格昂貴，也需要尋找費用更低速度更快的測序技術(shù)。第二代測序技術(shù)的合成思想與Sanger法完全不同，它的核心思想是邊合成邊測序，通過用不同的熒光標(biāo)記來標(biāo)記四種不同的的NTP，當(dāng)互補(bǔ)鏈在DNA酶作用下合成時，每插入一個dNTP就是有不同的熒光被釋放出來。通過設(shè)備捕捉這些熒光信號，并通過特定的計算機(jī)軟件處理，從而得到DNA的序列信息。第三代DNA測序技術(shù)又稱為單分子測序技術(shù)，它跟第二代測序技術(shù)類似，都是邊合成邊測序，單分子測序先將DNA打斷成眾多的小片段并制成液滴，然后將這些液滴分散到納米芯片的納米孔中，這些孔中有被錨定的DNA聚合酶。在聚合酶作用下，被不同熒光標(biāo)記的核苷酸會在激光束的激發(fā)下發(fā)出熒光，根據(jù)熒光類型就可以判定dNTP的種類。單分子測序技術(shù)需要的樣品量極少，而且操作步驟被簡化了，不需要掃描和洗滌，具有通量更高，儀器和試劑相對便宜、操作簡單等的優(yōu)勢。

總結(jié)

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