什么是分子信标?
分子信標是一種基于熒光共振能量轉移原理設計的一種新型核酸熒光探針,其與靶序列結合會發(fā)生結構的變化從而影響熒光信號。因其檢測具有高靈敏、高特異性,并且可用于活體的實時檢測,因而被廣泛的應用于生化分析,生物醫(yī)學等很多領域。
分子信標是一種熒光標記的寡核苷酸鏈,一般含有25~35個核苷酸。在結構上,分子信標大體上可以分為三部分:(1)、環(huán)狀區(qū):一般由15~30個核苷酸組成,可以與靶分子特異結合;(2)、莖干區(qū):一般由5~8個堿基對組成,在分子信標與靶分子結合過程中可發(fā)生可逆性解離。(3)、熒光基團和淬滅基團:熒光基團一般連接在5ˊ端;淬滅基團一般連接在3ˊ端,常用4-(4-二甲基氨基偶氮苯基)苯甲酸(DABCYL)作為淬滅基團。根據(jù)Foerster理論,中心熒光能量轉移效率與兩者距離的6次方成反比。所以只有熒光基團與淬滅基團之間達到一定的距離時才會產(chǎn)生熒光。
分子信標是一種呈發(fā)夾結構的莖環(huán)雙標記寡核苷酸探針,兩端的核酸序列互補配對,因此標記在一端的熒光基團與標記在另一端的淬滅基團緊緊靠近。熒光基團被激發(fā)后產(chǎn)生的光子被淬滅劑淬滅,由熒光基團產(chǎn)生的能量以紅外而不是可見光形式釋放出來。
分子信標是一種熒光標記的寡核苷酸鏈,一般含有25~35個核苷酸。在結構上,分子信標大體上可以分為三部分:(1)、環(huán)狀區(qū):一般由15~30個核苷酸組成,可以與靶分子特異結合;(2)、莖干區(qū):一般由5~8個堿基對組成,在分子信標與靶分子結合過程中可發(fā)生可逆性解離。(3)、熒光基團和淬滅基團:熒光基團一般連接在5ˊ端;淬滅基團一般連接在3ˊ端,常用4-(4-二甲基氨基偶氮苯基)苯甲酸(DABCYL)作為淬滅基團。根據(jù)Foerster理論,中心熒光能量轉移效率與兩者距離的6次方成反比。所以只有熒光基團與淬滅基團之間達到一定的距離時才會產(chǎn)生熒光。
分子信標是一種呈發(fā)夾結構的莖環(huán)雙標記寡核苷酸探針,兩端的核酸序列互補配對,因此標記在一端的熒光基團與標記在另一端的淬滅基團緊緊靠近。熒光基團被激發(fā)后產(chǎn)生的光子被淬滅劑淬滅,由熒光基團產(chǎn)生的能量以紅外而不是可見光形式釋放出來。
總結
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