噬菌體展示技術(shù)是將外源蛋白或多肽的DNA序列插入到噬菌體外殼蛋白結(jié)構(gòu)基因的適當(dāng)位置,使外源基因隨外殼蛋白而表達(dá),同時(shí)外源蛋白隨噬菌體的重新組裝而展示到噬菌體表面。可以通過(guò)改變插入的DNA序列,建立噬菌體“文庫(kù)”,便可針對(duì)不同靶點(diǎn)展開目的蛋白或多肽的篩選。利用該技術(shù)篩選得到的多肽為噬菌體展示肽。噬菌體展示技術(shù)的一般過(guò)程分為:第一步,將靶點(diǎn)分子固定到固相支持物上,然后加入某一特定的噬菌體文庫(kù)與之溫育,使之展示能與靶點(diǎn)分子結(jié)合的多肽蛋白噬菌體結(jié)合在固相載體上;第二步,將未結(jié)合的噬菌體洗去;第三步,用競(jìng)爭(zhēng)性洗脫或低pH緩沖液洗脫方法將結(jié)合的噬菌體洗脫下來(lái),并使之感染細(xì)菌進(jìn)行噬菌體擴(kuò)增,用于下一輪的篩選,經(jīng)過(guò)幾輪篩選循環(huán),最終可富集得到能與靶點(diǎn)分子特異性結(jié)合的噬菌體。通過(guò)分析噬菌體展示多肽蛋白所對(duì)應(yīng)的核苷酸序列和對(duì)應(yīng)的氨基酸序列,即可獲得該多肽蛋白的分子信息。

利用噬菌體表面展示技術(shù)可以構(gòu)建抗體庫(kù)、隨機(jī)肽庫(kù)、蛋白質(zhì)突變體庫(kù)和cDNA文庫(kù)．從而廣泛用于單克隆抗體的篩選、先導(dǎo)化合物的篩選、疫苗的研制，改造和提高蛋白類藥物、酶和抗體的生物學(xué)和免疫學(xué)屬性，尤其是在抗原表位分析、受體與配體結(jié)合位點(diǎn)確定等分子問(wèn)識(shí)別機(jī)制的研究方面，具有廣闊的應(yīng)用前景。

總結(jié)

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