细菌培养图片(细菌培养)
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1、細菌的培養方法 根據培養細菌的目的和培養物的特性培養方法分為一般培養法,二氧化碳培養法和厭氧培養法三種. 1. 一般培養法 將已接種過的培養基,置37℃培養箱內1824小時,需氧菌和兼性厭氧菌即可于培養基上生長.少數生長緩慢的細菌,需培養37天直至一個月才能生長.為使培養箱內保持一定濕度,可在其內放置一杯水.培養時間較長的培養基,接種后應將試管口塞棉塞后用石臘凡士林封固,以防培養基干裂. 2. 二氧化碳培養法 某些細菌,如牛流產布氏桿菌和胎兒弧菌等需要在含有10%二氧化碳的空氣中才能生長,尤其是初代分離培養要求更為嚴格.將已接種的培養基置于二氧化碳環境中進行培養的方法即二氧化碳培養法,常用方法有以下幾種: (1) 二氧化碳培養箱 可將已接種的培養基直接放入箱內孵育,即可獲得二氧化碳環境. (2) 燭缸法 將已接種的培養基,置于容量為2 000ml的磨口標本缸或干燥器內.缸蓋或缸口處均需涂以凡士林,然后點燃蠟燭直立置入缸中,密封缸蓋.待燃自行熄滅時,容器內約含510%的CO2 容器置37℃培養. (3) 重碳酸鈉鹽酸法 每升容積的容器內,重碳酸鈉與鹽酸按0.4g與3.5ml的比例,分別將兩種藥各置一器皿內(如平皿內),連同器皿置于標本缸或干燥器內,蓋嚴后使容器傾斜,兩種藥品接觸后即可產生二氧化碳. 3. 厭氧培養法 目前常用的厭氧培養方法有厭氧罐法,氣袋法及厭氧箱三種. (1) 厭氧罐法 是目前應用較廣泛的一種方法,共分為以下幾種. 抽氣換氣法:該法適用于一般實驗室,其特點是較經濟并可迅速建立厭氧環境.標本接種后,將平板放入厭氧罐,擰緊蓋子,用真空泵抽出罐中空氣,使壓力真空表至79.98KPa,停止抽氣,充入高純氮氣使壓力真空表指針回0位,連續反復3次,最后在罐內79.98KPa的情況下,充入70%的N2 ,20%H2 ,10%CO2 (有人改用20%CO2 及80%H2 ,亦可獲得好結果).罐中需放入冷催化劑鈀粒,可催化罐中殘余的O2 和H2 化合成水.同時罐中應放有美藍指示管,美藍在有氧的環境下呈藍色,無氧時為紅色.臨用前首先將美藍煮沸使變成無色,放入罐中先呈淺藍色,待罐中無氧環境形成,美藍即可持續無色. 氣體發生袋法:氣體發生袋系由錫箔密封包裝,其中含有兩種藥片,一種為含枸椽酸和重碳酸氫鈉的藥片,另一種是含有硼氫化鈉的藥片.前者遇水放出二氧化碳,后者可釋放氫.使用時在袋的右上角剪一小口,灌進10ml蒸餾水,立即放入含有鈀粒,指示劑及平板培養基的厭氧罐中,擰緊蓋子經23分鐘后,可感到蓋子微熱并有少量水蒸氣出現.密封后1小時左右罐中的O2 的含量可低于<1%. (2) 氣袋法 此種方法不需要特殊設備,操作簡單,使用方便,不但實驗室中可用,而且外出采樣,現場接種也可用.原理與氣體發生袋完全相同,只是采用塑料袋代替了厭氧罐,氣袋為一透明而密閉的塑料袋,內裝有氣體發生安瓿,指示劑安瓿,含有催化劑的帶孔塑料管各一支.其操作方法為首先將接種的平板培養基放入袋中,用彈簧夾夾緊袋口,然后用手指壓碎氣體安瓿,20分鐘后再壓碎指示劑安瓿,如果指示劑不變藍色,說明袋內達到厭氧狀態,即可放入37℃進行培養. (3) 厭氧培養箱 使用之前須仔細檢查厭氧裝備有無漏氣等問題,以及催化劑,指示劑質量等.使用時嚴格遵守操作規程,保證箱內氣體比例合理.。
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