细胞冻存及细胞计数的技巧
生活随笔
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细胞冻存及细胞计数的技巧
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成功凍存細胞和復蘇細胞是細胞培養研究的兩個重要方面,細胞本身的特性和細胞低溫儲藏時防止冰晶形成是維持細胞活力的關鍵。
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1.凍存“年輕力壯”的細胞
為保證細胞在復蘇后,有良好的增殖能力,建議凍存傳代三代以內的細胞。俗話說得好,年輕人的恢復能力是杠杠滴!細胞亦是如此~
2.在凍存之前一定要先了解清楚該細胞的增殖呢李并凍存適當數量的細胞
每種細胞的增殖能力各不相同,知己知彼才能百戰不殆。如果增殖能力不高,可以在凍存細胞時,用10%-90%的血清(多數常見細胞株可用20%)維護細胞活力,并且提高每份凍存的細胞數量。
通常,凍存液中細胞的最終密度為5×106/mL~1×107/mL。如同美食和閨蜜使我心寬體胖,細胞也需要充足的營養和同伴的互相扶持才能茁壯成長。
3.細胞凍存一定要緩慢降溫
DMSO可保護細胞免受冰晶導致的機械損傷,一般用培養液配制10% DMSO作為凍存液。
但是如果降溫迅速,即使有DMSO的保護,也可能會產生少量冰晶損傷細胞。
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總結
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