要守護(hù)愛情，先了解如何相處，一切從 CoIP 的原理談起：免疫共沉淀是一種以抗體和抗原識別專一性為基礎(chǔ)，用于研究蛋白質(zhì)相互作用的經(jīng)典方法。

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從原理示意圖可見，免疫共沉淀利用抗原?(紅三角) 與蛋白?(藍(lán)圓柱) 的特異性結(jié)合，再通過連接著樹脂的抗體?(紫圓球) 去識別抗原，從細(xì)胞裂解液或者蛋白混合物中捕獲與抗原相作的蛋白。

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之后通過進(jìn)一步洗脫，獲取抗原-蛋白復(fù)合物，再對蛋白進(jìn)行檢測（Western Blot 或者 Mass spectra），即可獲得蛋白間相互作用的信息。

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實(shí)驗(yàn)步驟

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了解了原理，再來看看操作，簡單來說，可以總結(jié)為以下四個(gè)部分：

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第一步：樣品制備

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首先進(jìn)行樣品制備，以提取出想要研究的蛋白，由于不同類型的細(xì)胞裂解條件有所差異，這里不展開介紹。

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注意事項(xiàng)：

• 細(xì)胞裂解要采用溫和的裂解條件，避免破壞細(xì)胞內(nèi)存在的蛋白間相互作用，裂解、洗滌時(shí)需使用非變性裂解液，如?NP-40 和 Triton X-100。

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總結(jié)

以上是生活随笔為你收集整理的一文读懂CoIP实验：原理、实验流程、遇到的问题的全部內(nèi)容，希望文章能夠幫你解決所遇到的問題。

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