WB实验关键点!附详细实验检查清单
生活随笔
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WB实验关键点!附详细实验检查清单
小編覺得挺不錯的,現在分享給大家,幫大家做個參考.
樣本選擇和處理
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蛋白分子參與生命活動的各個過程,其功能復雜多樣,有些蛋白可能只在部分組織和細胞表達(圖2)。有些蛋白可能需要誘導,才能表達或表達量增加(圖3)。有些蛋白可能存在翻譯后修飾,導致其蛋白分子量大小可能與預測不符(圖3,4)。有些蛋白可能有多個異構體或者容易被降解,導致出現多條條帶的現象(圖3)。因此,只有足夠了解您研究的蛋白特性,您才能在樣本的選擇和處理上得心應手,美美的開啟您的 WB 之旅。
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?圖2. MMP9 在不同細胞系表達水平不同。
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| Lane 1: | LoVo 全細胞裂解液 |
| Lane 2: | Huh7 全細胞裂解液 |
| Lane 3: | MCF7 全細胞裂解液 |
| Lane 4: | HeLa 全細胞裂解液 |
| Lane 5: | Caco-2 全細胞裂解液 |
| Lane 6: | A549(血清饑餓誘導過夜)全細胞裂解液 |
| Lane 7: | A549(血清饑餓誘導過夜,80nM TPA 處理24小時)全細胞裂解液 |
| Lane 8: | MDA-MB-231(血清饑餓誘導過夜)全細胞裂解液 |
| Lane 9: | MDA-MB-231(血清饑餓誘導過夜后,200nM TPA 處理 24 小時)全細胞裂解液 |
| Lane 10: | HepG2 全細胞裂解液 ? |
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總結
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