功能克隆是一项什么克隆技术,有什么特点?
生活随笔
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功能克隆是一项什么克隆技术,有什么特点?
小編覺(jué)得挺不錯(cuò)的,現(xiàn)在分享給大家,幫大家做個(gè)參考.
功能克隆是一種研究基因功能的方法,當(dāng)我們需要對(duì)蛋白進(jìn)行分析測(cè)定功能時(shí),需要對(duì)表達(dá)蛋白的氨基酸序列進(jìn)行測(cè)定,推算出翻譯這部分序列的mRNA序列,設(shè)計(jì)引物使用反義PCR擴(kuò)增cDNA,得到目的片段后進(jìn)行測(cè)序分析。但這個(gè)操作過(guò)程非常繁瑣,需要經(jīng)過(guò)多步實(shí)驗(yàn)。
功能克隆是指從對(duì)一種致病基因的功能的理解出發(fā)克隆該致病基因。這種方法主要用于某些生物化學(xué)機(jī)理已經(jīng)明確,基因表達(dá)產(chǎn)物較易得到部分純化的遺傳性疾病,實(shí)際上是利用純化蛋白克隆致病基因。而獲得部分純化的蛋白質(zhì)后可以采用兩種方式進(jìn)行基因的克隆,一是根據(jù)已知的部分氨基酸序列合成寡核苷酸作為探針,篩選cDNA文庫(kù);二是利用特異性抗體篩選表達(dá)型cDNA文庫(kù)。
功能克隆是指從對(duì)一種致病基因的功能的理解出發(fā)克隆該致病基因。這種方法主要用于某些生物化學(xué)機(jī)理已經(jīng)明確,基因表達(dá)產(chǎn)物較易得到部分純化的遺傳性疾病,實(shí)際上是利用純化蛋白克隆致病基因。而獲得部分純化的蛋白質(zhì)后可以采用兩種方式進(jìn)行基因的克隆,一是根據(jù)已知的部分氨基酸序列合成寡核苷酸作為探針,篩選cDNA文庫(kù);二是利用特異性抗體篩選表達(dá)型cDNA文庫(kù)。
總結(jié)
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