多重PCR(multiplex PCR)主要用在哪些方面?
生活随笔
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多重PCR(multiplex PCR)主要用在哪些方面?
小編覺得挺不錯的,現(xiàn)在分享給大家,幫大家做個參考.
多重PCR是用多對引物同時對模板DNA上的多個區(qū)域進行擴增。多重PCR技術的難點不是在于其原理和操作的復雜性,而是在于其多對引物的設計,必需保證多對引物之間不形成引物二聚體,引物與目標模板區(qū)域具有高度特異 性。應用于基因診斷,對與疾病相關的基因(龐大)進行擴增檢測。
多重PCR的用途主要有兩方面: 1.多種病原微生物的同時檢測或鑒定,它是在同一PCR反應管中同時加上多種病原微生物的特異性引物,進行PCR擴增.可用于同時檢測多種病原體或鑒定出是那一型病原體感染,可系統(tǒng)組合的有:①肝炎病毒的感染,在同一病人或同一供血者體內,有時存在多種肝炎病毒重疊感染,有時是甲乙丙型肝炎病毒重疊;有時可能是甲乙型肝炎病毒重疊;有時是乙丙型肝炎病毒重疊.②腸道致病性細菌的檢測,如傷寒,痢疾和霍亂,有時具有較相同的腸道癥狀,有時痢疾霍亂同存一病人并同時發(fā)病.③性病的檢測,如梅毒,淋病及艾滋病的診斷.④戰(zhàn)傷細菌及生物戰(zhàn)劑細菌的檢測,如破傷風桿菌,產氣莢膜桿菌,炭疽桿菌,鼠疫桿菌等偵檢.⑤需特殊培養(yǎng)的無芽胞厭氧菌,如脆弱類桿菌、艱難桿菌的鑒定等. 2,病原微生物,某些遺傳病及癌基因的分型鑒定:某些病原微生物,某些遺傳病或癌基因,型別較多,或突變或缺失存在多個好發(fā)部位,多重PCR可提高其檢出率并同時鑒定其型別及突變等可系統(tǒng)應用的有:乙型肝炎病毒的分型;乳頭瘤病毒的分型;單純皰疹病毒的分型;杜氏肌營養(yǎng)不良癥的分型及癌基因的檢測等.
科學家不斷開發(fā)新的多重PCR方法在,這些方法可有特定的應用:2009年,美國猶他州大學的Richard Cawthon在《核酸研究》上發(fā)表了一篇文章,介紹了一種新的單色多重qPCR技術(monochrome multiplex qPCR)。該技術成功實現(xiàn)了對端粒長度的測定及與疾病關系的探究。另一種新興的多重PCR技術是等位基因特異的甲基化多重qPCR(ASMM RTQ-PCR)。一個研究小組證實了它在診斷Beckwith-Wiedemann綜合征和Russell-Silver綜合征上的有效性。此外,ASMM RTQ-PCR還能夠驗證全基因組甲基化研究的結果。
多重PCR的主要用于多種病原微生物的同時檢測或鑒定和病原微生物,某些遺傳病及癌基因的分型鑒定。多種病原微生物的同時檢測或鑒定,是在同一PCR反應管中同時加上多種病原微生物的特異性引物,進行PCR擴增.可用于同時檢測多種病原體或鑒定出是那一型病原體感染。
多重PCR可以減少假陽性的出現(xiàn),而 且可以使檢測的下限下降幾個數(shù)量級。采用多對特異性引物,通過多重PCR法檢測乙肝患者血清中乙型肝炎病毒(HBV)基因型的分布情況.可以應用于對轉基因食品進行PCR 檢測。梅毒螺旋體檢測與基因分型。調查商品肉弓形蟲污染和動物弓形蟲感染情況。
一般PCR僅應用一對引物,通過PCR擴增產生一個核酸片段,主要用于單一致病因子等的鑒定.多重PCR它是在同一PCR反應體系里加上二對以上引物,同時擴增出多個核酸片段的PCR反應,其反應原理,反應試劑和操作過程與一般PCR相同. 多重PCR的主要用于多種病原微生物的同時檢測或鑒定和病原微生物,某些遺傳病及癌基因的分型鑒定。多種病原微生物的同時檢測或鑒定,是在同一PCR反應管中同時加上多種病原微生物的特異性引物,進行PCR擴增.
多重PCR的用途主要有兩方面: 1.多種病原微生物的同時檢測或鑒定,它是在同一PCR反應管中同時加上多種病原微生物的特異性引物,進行PCR擴增.可用于同時檢測多種病原體或鑒定出是那一型病原體感染,可系統(tǒng)組合的有:①肝炎病毒的感染,在同一病人或同一供血者體內,有時存在多種肝炎病毒重疊感染,有時是甲乙丙型肝炎病毒重疊;有時可能是甲乙型肝炎病毒重疊;有時是乙丙型肝炎病毒重疊.②腸道致病性細菌的檢測,如傷寒,痢疾和霍亂,有時具有較相同的腸道癥狀,有時痢疾霍亂同存一病人并同時發(fā)病.③性病的檢測,如梅毒,淋病及艾滋病的診斷.④戰(zhàn)傷細菌及生物戰(zhàn)劑細菌的檢測,如破傷風桿菌,產氣莢膜桿菌,炭疽桿菌,鼠疫桿菌等偵檢.⑤需特殊培養(yǎng)的無芽胞厭氧菌,如脆弱類桿菌、艱難桿菌的鑒定等. 2,病原微生物,某些遺傳病及癌基因的分型鑒定:某些病原微生物,某些遺傳病或癌基因,型別較多,或突變或缺失存在多個好發(fā)部位,多重PCR可提高其檢出率并同時鑒定其型別及突變等可系統(tǒng)應用的有:乙型肝炎病毒的分型;乳頭瘤病毒的分型;單純皰疹病毒的分型;杜氏肌營養(yǎng)不良癥的分型及癌基因的檢測等.
科學家不斷開發(fā)新的多重PCR方法在,這些方法可有特定的應用:2009年,美國猶他州大學的Richard Cawthon在《核酸研究》上發(fā)表了一篇文章,介紹了一種新的單色多重qPCR技術(monochrome multiplex qPCR)。該技術成功實現(xiàn)了對端粒長度的測定及與疾病關系的探究。另一種新興的多重PCR技術是等位基因特異的甲基化多重qPCR(ASMM RTQ-PCR)。一個研究小組證實了它在診斷Beckwith-Wiedemann綜合征和Russell-Silver綜合征上的有效性。此外,ASMM RTQ-PCR還能夠驗證全基因組甲基化研究的結果。
多重PCR的主要用于多種病原微生物的同時檢測或鑒定和病原微生物,某些遺傳病及癌基因的分型鑒定。多種病原微生物的同時檢測或鑒定,是在同一PCR反應管中同時加上多種病原微生物的特異性引物,進行PCR擴增.可用于同時檢測多種病原體或鑒定出是那一型病原體感染。
多重PCR可以減少假陽性的出現(xiàn),而 且可以使檢測的下限下降幾個數(shù)量級。采用多對特異性引物,通過多重PCR法檢測乙肝患者血清中乙型肝炎病毒(HBV)基因型的分布情況.可以應用于對轉基因食品進行PCR 檢測。梅毒螺旋體檢測與基因分型。調查商品肉弓形蟲污染和動物弓形蟲感染情況。
一般PCR僅應用一對引物,通過PCR擴增產生一個核酸片段,主要用于單一致病因子等的鑒定.多重PCR它是在同一PCR反應體系里加上二對以上引物,同時擴增出多個核酸片段的PCR反應,其反應原理,反應試劑和操作過程與一般PCR相同. 多重PCR的主要用于多種病原微生物的同時檢測或鑒定和病原微生物,某些遺傳病及癌基因的分型鑒定。多種病原微生物的同時檢測或鑒定,是在同一PCR反應管中同時加上多種病原微生物的特異性引物,進行PCR擴增.
總結
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