該方法又稱為等位基因特異的動(dòng)力學(xué)PCR,原理是根據(jù)SNP兩種不同的核苷酸合成兩條與其互補(bǔ)的引物,共有一條通用引物,以SYBR Greenn為熒光染料,將一個(gè)DNA樣本分成兩管行實(shí)時(shí)動(dòng)態(tài)熒光PCR反應(yīng);雜合子2種等位基因的數(shù)量相同,經(jīng)過(guò)相同循環(huán)次數(shù)的擴(kuò)增后同一個(gè)樣本的2個(gè)反應(yīng)的可測(cè)熒光強(qiáng)度相同的,而純合子可測(cè)熒光強(qiáng)度是相同時(shí),擴(kuò)增次數(shù)是不同的,據(jù)此進(jìn)行SNP分型。該方法與TaqMan法具有相同的優(yōu)點(diǎn)和通量,因?yàn)闊o(wú)需合成熒光探針,所以成本更低。缺點(diǎn)是個(gè)別SNP的分型成功率不高。

總結(jié)

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