肺结核病菌的检测方法有哪些?各有什么优势?
生活随笔
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肺结核病菌的检测方法有哪些?各有什么优势?
小編覺得挺不錯的,現在分享給大家,幫大家做個參考.
樓上表述的很全面。最常用的方法應該是做PPD(結核菌素試驗):結核菌素試驗注射后72小時看結果,主要測量硬結的直徑,小于5mm為陰性,5-9mm為弱陽性(提示結核菌感染或非結核性分支桿菌感染),10-19mm為陽性反應,20mm以上或局部發生水泡與壞死者為強陽性反應。要注意的是,有下列情況存在時,結核菌素試驗也可能呈現陰性反應:①初次感染結核桿菌8周內,由于機體的BT反應尚未建立,結核菌素試驗可出現陰性結果。②當機體免疫功能低下或受抑制時,如嚴重營養不良、重癥結核、腫瘤、HIV感染、麻疹、百日咳、猩紅熱、重度脫水、重度水腫等,可呈假陰性反應。③使用糖皮質激素、免疫抑制劑者,結核菌素反應也可暫時消失。④某些老年人的結核菌素試驗結果經常為陰性。
我們在醫院檢查結核病的步驟一般是:1、第一懷疑病癥:患兒頸部、腋下,腹股溝等部位的淋巴結有輕度腫大;肺部檢查,很少有異常發現;心率較快,肝脾也可輕度腫大。,可懷疑為結核病癥狀。 2、第二X線檢查:普通X線檢查分透視和折片兩種方式。透視可以幫助觀察一些不易發現部位的閏灶,如心臟后,肺門等處的病變;幫助確定病變的具體位置;而拍片實際上就是把透視所看到的景象用X線膠片保留下來,供醫生更仔細地觀察,還可以用來了解病情變化的情況。目前CT已經廣泛應用,它可以發現地些隱匿性病灶,即普通X線檢查不能或難以顯示的病灶,并且還可對病變性質鑒別起重要的作用。3、第三項檢查是結核菌素試驗,是應用結核菌素進行皮膚試驗來測定機體對結核分枝桿菌是否能引起超敏反應的一種試驗,是診斷小兒結核病比較有價值的一項檢查4、第四實驗室檢查:主要有以下幾個方面:①細菌學診斷;常用的有涂片栓菌和結核菌培養兩種方法,可用痰液,胃液,腦站脊液進行檢查,結核菌的檢出是診斷結核病最有力的證據。②結核菌的基因診斷:主要有聚合酶鏈反應(pcr),核酸指印技術等方法,這一類檢測方法的特點是快速、靈敏,特異性強。③免疫學診斷:包括結合菌抗原和抗結合抗體的檢查,也是一種快速、簡便有價值的實驗室輔助檢查 作為一種補充,肺結核既然由結核菌引起,就應該可以使用結核菌檢測方法,主要有三種大類檢測法:細菌學、免疫學、分子生物學。 傳統實驗室常見的結核菌細菌學檢測方法有如下5種,但該傳統方法的準確率較低。 (1)痰涂片鏡檢法:是全世界的結核病實驗室外都在使用的最基本的細菌學檢查方法,其特點是簡單、快速和價廉,當天出結果,但無法辨別死菌活菌;敏感性低,通常需5000-10000條菌/ml才能夠得到陽性結果;特異性差,各種抗酸桿菌均可著色,需要通過進一步試驗才可確定是否為結核菌,有關這一方法的改進研究和評價很多,但由于檢測原理的限制,不可能出現突破性的進展。 (2)痰結核菌常規培養法:是鑒定死菌活菌的可靠方法,被譽為“黃金標準”。缺點是時間長,需求周才能報出結果,且敏感性低,涂片陽性標本只有約80%培養陽性;特異性差,各種分枝桿菌均可生長,需結合藥物敏感性試驗和分枝桿菌菌種鑒定,才可確定是否為結核菌。 (3)藥物敏感性試驗:用于鑒定結核菌對抗菌素結核藥物的敏感性水平。這項試驗通常是在痰結核菌培養的基礎上進行的,故需時更長。 (4)分枝桿菌菌種鑒定:是根據不同分枝桿菌的理化特性,以生物化學的方法為主。醫.學教育網搜集整理可以精確地鑒定分枝桿菌的不同菌種,但操作復雜,且個別試驗使用的藥品,有一定的危險性。 (5)痰結核菌快速培養系統:20世紀70年代發展的一種新的結核病細菌學檢查方法——痰結核菌快速培養、藥敏系統。該方法將陽性檢出時間較L-J法明顯縮短,從常規培養的8周縮短到3-14d,且具有操作簡便、自動化強、靈敏度高等優點,在結核病的細菌學診斷中起到了重要作用,促進了結核病細菌學診斷的發展。主要問題是儀器與試劑的價格昂貴,難以廣泛應用。 ** 常見的分子生物學檢測法**:采用TaqMan探針熒光聚合酶鏈式反應技術原理,可在1天內完成臨床樣品處理、核酸提取和熒光PCR檢測方法,具有快速簡便,特異性強、敏感度高的特點,主要用于早期確診。 免疫學診斷:包括結合菌抗原和抗結合抗體的檢查,也是一種快速、簡便有價值的實驗室輔助檢查。 其他檢查1、纖維支氣管鏡檢查:可以直接觀察或間接判斷支氣管、肺內病變,并且有活組織檢查、灌洗、錄像、拍攝氣管內照片等功能,對于診斷和鑒別診斷特別有用。肺部X線檢查不但可早期發現肺結核,而且可對病兆的部位、范圍、性質、發展情況和效果作出診斷。
肺結核病由結核分枝桿菌引起,結核分枝桿菌(M.tuberculosis),俗稱結核桿菌,是引起結核病的病原菌,可侵犯全身各器官,以肺結核為最多見。結核分枝桿菌檢測方法主要有:一、結核菌素試驗結核菌素試驗是應用結核菌素進行皮膚試驗來測定機體對結核分枝桿菌是否能引起超敏反應的一種試驗。二、結核菌γ干擾素釋放試驗細胞免疫介導的結核菌γ干擾素釋放試驗(T-cell interferon gamma release assays,TIGRA,又稱IFNGRA或GRA)是近年來采用酶聯免疫吸附測定(ELISA)或酶聯免疫斑點(ELISPOT)法定量檢出受檢者全血或外周血單個核細胞對結核分枝桿菌特異性抗原的IFN-γ檢測釋放反應,用于結核菌潛伏感染的診斷。IFN-γ為Thl細胞分泌的一種細胞因子,不但能夠反映機體結核的Thl細胞免疫情況,還與體內結核菌的抗原含量密切相關。被結核分枝桿菌抗原致敏的T細胞再遇到同類抗原時能產生高水平的IFN-γ,因此被用于結核潛伏感染的診斷。三、微生物學檢查法1.標本標本的選擇根據感染部位。可取痰、支氣管灌洗液、尿、糞、腦脊液或胸、腹水。其他肺外感染可取血或相應部位分泌液或組織細胞。2.直接涂片鏡檢3.濃縮集菌4.分離培養將經中和集菌材料接種于固體培養基,器皿口加橡皮塞于37℃培養,每周觀察1次。結核分枝桿菌生長緩慢,一般需2~4周長成肉眼可見的落菌。液體培養可將集菌材料滴加于含血清的培養液,則可于1~2周在管底見有顆粒生長。取沉淀物作涂片,能快速獲得結果,并可進一步作生化、藥敏等測定和區分結核分枝桿菌與非結核分枝桿菌。國內學者已證明結核分枝桿菌L型可存在于血細胞內或粘附于細胞表面。這種患者往往血沉加快,用低滲鹽水溶血后立即接種高滲結核分枝桿菌L型培養基能提高培養陽性率。5.動物試驗將集菌后的材料注射于豚鼠腹股溝皮下,3~4周后若局部淋巴結腫大,結核菌素試驗陽轉,即可進行解剖。觀察肺、肝、淋巴結等器官有無結核病變,并作形態、培養等檢查。若6~8周仍不見發病,也應進行解剖檢查。四、快速診斷法目前已將多聚酶鏈反應(PCR)擴增技術應用于結核分枝桿菌DNA鑒定,每ml中只需含幾個細菌即可獲得陽性,且1-2d得出結果。操作中需注意實驗器材的污染問題,以免出現假陽性。又細菌L型由于缺壁并有代償性細胞膜增厚,而一般常用的溶菌酶不能使細胞膜破裂釋出DNA,以致造成PCR假陰性。用組織磨碎器充分研磨使細胞破裂后,則可出現陽性。目前有條件的單位使用BACTEC法,以含14C棕櫚酸作碳源底物的7H12培養基,測量在細菌代謝過程中所產生的14C量推算出標本中是否有抗酸桿菌,5~7d就可出報告。
我們在醫院檢查結核病的步驟一般是:1、第一懷疑病癥:患兒頸部、腋下,腹股溝等部位的淋巴結有輕度腫大;肺部檢查,很少有異常發現;心率較快,肝脾也可輕度腫大。,可懷疑為結核病癥狀。 2、第二X線檢查:普通X線檢查分透視和折片兩種方式。透視可以幫助觀察一些不易發現部位的閏灶,如心臟后,肺門等處的病變;幫助確定病變的具體位置;而拍片實際上就是把透視所看到的景象用X線膠片保留下來,供醫生更仔細地觀察,還可以用來了解病情變化的情況。目前CT已經廣泛應用,它可以發現地些隱匿性病灶,即普通X線檢查不能或難以顯示的病灶,并且還可對病變性質鑒別起重要的作用。3、第三項檢查是結核菌素試驗,是應用結核菌素進行皮膚試驗來測定機體對結核分枝桿菌是否能引起超敏反應的一種試驗,是診斷小兒結核病比較有價值的一項檢查4、第四實驗室檢查:主要有以下幾個方面:①細菌學診斷;常用的有涂片栓菌和結核菌培養兩種方法,可用痰液,胃液,腦站脊液進行檢查,結核菌的檢出是診斷結核病最有力的證據。②結核菌的基因診斷:主要有聚合酶鏈反應(pcr),核酸指印技術等方法,這一類檢測方法的特點是快速、靈敏,特異性強。③免疫學診斷:包括結合菌抗原和抗結合抗體的檢查,也是一種快速、簡便有價值的實驗室輔助檢查 作為一種補充,肺結核既然由結核菌引起,就應該可以使用結核菌檢測方法,主要有三種大類檢測法:細菌學、免疫學、分子生物學。 傳統實驗室常見的結核菌細菌學檢測方法有如下5種,但該傳統方法的準確率較低。 (1)痰涂片鏡檢法:是全世界的結核病實驗室外都在使用的最基本的細菌學檢查方法,其特點是簡單、快速和價廉,當天出結果,但無法辨別死菌活菌;敏感性低,通常需5000-10000條菌/ml才能夠得到陽性結果;特異性差,各種抗酸桿菌均可著色,需要通過進一步試驗才可確定是否為結核菌,有關這一方法的改進研究和評價很多,但由于檢測原理的限制,不可能出現突破性的進展。 (2)痰結核菌常規培養法:是鑒定死菌活菌的可靠方法,被譽為“黃金標準”。缺點是時間長,需求周才能報出結果,且敏感性低,涂片陽性標本只有約80%培養陽性;特異性差,各種分枝桿菌均可生長,需結合藥物敏感性試驗和分枝桿菌菌種鑒定,才可確定是否為結核菌。 (3)藥物敏感性試驗:用于鑒定結核菌對抗菌素結核藥物的敏感性水平。這項試驗通常是在痰結核菌培養的基礎上進行的,故需時更長。 (4)分枝桿菌菌種鑒定:是根據不同分枝桿菌的理化特性,以生物化學的方法為主。醫.學教育網搜集整理可以精確地鑒定分枝桿菌的不同菌種,但操作復雜,且個別試驗使用的藥品,有一定的危險性。 (5)痰結核菌快速培養系統:20世紀70年代發展的一種新的結核病細菌學檢查方法——痰結核菌快速培養、藥敏系統。該方法將陽性檢出時間較L-J法明顯縮短,從常規培養的8周縮短到3-14d,且具有操作簡便、自動化強、靈敏度高等優點,在結核病的細菌學診斷中起到了重要作用,促進了結核病細菌學診斷的發展。主要問題是儀器與試劑的價格昂貴,難以廣泛應用。 ** 常見的分子生物學檢測法**:采用TaqMan探針熒光聚合酶鏈式反應技術原理,可在1天內完成臨床樣品處理、核酸提取和熒光PCR檢測方法,具有快速簡便,特異性強、敏感度高的特點,主要用于早期確診。 免疫學診斷:包括結合菌抗原和抗結合抗體的檢查,也是一種快速、簡便有價值的實驗室輔助檢查。 其他檢查1、纖維支氣管鏡檢查:可以直接觀察或間接判斷支氣管、肺內病變,并且有活組織檢查、灌洗、錄像、拍攝氣管內照片等功能,對于診斷和鑒別診斷特別有用。肺部X線檢查不但可早期發現肺結核,而且可對病兆的部位、范圍、性質、發展情況和效果作出診斷。
肺結核病由結核分枝桿菌引起,結核分枝桿菌(M.tuberculosis),俗稱結核桿菌,是引起結核病的病原菌,可侵犯全身各器官,以肺結核為最多見。結核分枝桿菌檢測方法主要有:一、結核菌素試驗結核菌素試驗是應用結核菌素進行皮膚試驗來測定機體對結核分枝桿菌是否能引起超敏反應的一種試驗。二、結核菌γ干擾素釋放試驗細胞免疫介導的結核菌γ干擾素釋放試驗(T-cell interferon gamma release assays,TIGRA,又稱IFNGRA或GRA)是近年來采用酶聯免疫吸附測定(ELISA)或酶聯免疫斑點(ELISPOT)法定量檢出受檢者全血或外周血單個核細胞對結核分枝桿菌特異性抗原的IFN-γ檢測釋放反應,用于結核菌潛伏感染的診斷。IFN-γ為Thl細胞分泌的一種細胞因子,不但能夠反映機體結核的Thl細胞免疫情況,還與體內結核菌的抗原含量密切相關。被結核分枝桿菌抗原致敏的T細胞再遇到同類抗原時能產生高水平的IFN-γ,因此被用于結核潛伏感染的診斷。三、微生物學檢查法1.標本標本的選擇根據感染部位。可取痰、支氣管灌洗液、尿、糞、腦脊液或胸、腹水。其他肺外感染可取血或相應部位分泌液或組織細胞。2.直接涂片鏡檢3.濃縮集菌4.分離培養將經中和集菌材料接種于固體培養基,器皿口加橡皮塞于37℃培養,每周觀察1次。結核分枝桿菌生長緩慢,一般需2~4周長成肉眼可見的落菌。液體培養可將集菌材料滴加于含血清的培養液,則可于1~2周在管底見有顆粒生長。取沉淀物作涂片,能快速獲得結果,并可進一步作生化、藥敏等測定和區分結核分枝桿菌與非結核分枝桿菌。國內學者已證明結核分枝桿菌L型可存在于血細胞內或粘附于細胞表面。這種患者往往血沉加快,用低滲鹽水溶血后立即接種高滲結核分枝桿菌L型培養基能提高培養陽性率。5.動物試驗將集菌后的材料注射于豚鼠腹股溝皮下,3~4周后若局部淋巴結腫大,結核菌素試驗陽轉,即可進行解剖。觀察肺、肝、淋巴結等器官有無結核病變,并作形態、培養等檢查。若6~8周仍不見發病,也應進行解剖檢查。四、快速診斷法目前已將多聚酶鏈反應(PCR)擴增技術應用于結核分枝桿菌DNA鑒定,每ml中只需含幾個細菌即可獲得陽性,且1-2d得出結果。操作中需注意實驗器材的污染問題,以免出現假陽性。又細菌L型由于缺壁并有代償性細胞膜增厚,而一般常用的溶菌酶不能使細胞膜破裂釋出DNA,以致造成PCR假陰性。用組織磨碎器充分研磨使細胞破裂后,則可出現陽性。目前有條件的單位使用BACTEC法,以含14C棕櫚酸作碳源底物的7H12培養基,測量在細菌代謝過程中所產生的14C量推算出標本中是否有抗酸桿菌,5~7d就可出報告。
總結
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