爱健生物基于半导体测序的无创产前基因检测技术和普通的高通量测序有什么差别?
生活随笔
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爱健生物基于半导体测序的无创产前基因检测技术和普通的高通量测序有什么差别?
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目前來說成為標準方法還不太可能,因為半導體測序是第三代測序技術,該技術目前測序錯誤率較第二代測序儀器高很多,測序質量并不可靠,但是其快速低價的優點是最大的賣點,在未來技術革新后,該技術或許會由于廉價快速獲得大發展。2010年2月,羅森博格的Ion Torrent公司推出了世界上第一臺半導體測序儀——PGM,這也是首臺“椅上型”(benchtop)測序儀。PGM的測序原理不同于此前的測序技術。測序儀的半導體芯片上有微孔,每個微孔里都裝著一個待測的單鏈DNA模板和一個DNA聚合酶。測序過程中,含有任意一種堿基的dNTP溶液會被加入微孔中。如果所加入的dNTP與模板鏈上的堿基匹配,就會與之結合,釋放氫離子,降低溶液的pH值。pH值的變化會被ISFET傳感器探測到。因此,如果加入的是含有腺嘌呤(A)的溶液,那么傳感器就能確定與腺嘌呤發生反應的是哪些微孔里的待測DNA,繼而根據堿基配對原則,斷定待測DNA上的堿基是胸腺嘧啶(T)。而那些沒有結合到模板的dNTP就會被清洗掉,開始下一輪測序。相比CE測序技術,這樣的測序過程所用的時間大大縮短,因為不需要通過計算機的后期分析來斷定所測的堿基。同時,測序所使用的微芯片的價格,也遠低于CE所使用的激光設備。二代測序的原理有所不同,主要以羅氏和illuminated為代表,但即使是Illumina本身的產品,也會有不同的技術革新。Illumina/Solexa Genome Analyzer測序的基本原理是邊合成邊測序。在Sanger等測序方法的基礎上,通過技術創新,用不同顏色的熒光標記四種不同的dNTP,當DNA聚合酶合成互補鏈時,每添加一種dNTP就會釋放出不同的熒光,根據捕捉的熒光信號并經過特定的計算機軟件處理,從而獲得待測DNA的序列信息。
總結
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