組成基因疫苗的兩大要素是目的基因和表達載體。目的基因一般是指編碼某抗原的cDNA序列,要求該基因片段能在哺乳動物細胞中表達;載體主要用質粒,因質粒可用大腸桿菌大量生產,但不會在哺乳細胞中復制和整合。常用的有pSV2、pRSV、pcDNA3.1和pCI等質粒。基因疫苗的構建是在細菌質粒上引入一個真核啟動子,如人巨細胞病毒早期啟動子(CMV-IE),在啟動子的下游克隆進感興趣的目的基因,其后接上PolyA和轉錄終止序列。簡言之,在真核表達質粒上克隆進某抗原基因的cDNA序列,即構成了DNA疫苗或基因疫苗。由于質粒上不僅有大腸桿菌的復制起點,而且有真核啟動子,所以基因疫苗既能在大腸桿菌中復制,又能在真核細胞表達。質粒經細菌擴增,再提取和純化后溶于生理鹽水溶液就可直接用于免疫接種。

總結

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